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灰葡萄孢的分离方法

点击次数:796 更新时间:2017-01-03

1、材料与方法

1.1实验仪器

净化工作台, 恒温培养箱, 显微摄影仪等。

1.2生理试验培养基

( 1) 巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒无碳源基础培养基: NaNO 3 3g ; KH 2 PO 4 1g; KCl0. 5g ; MgSO 4 ?7H 2 O0. 5g ;FeSO 4 ?7H 2 O 0. 1 g; MnCl 2 ?4H 2 O 0. 08 g; 去离子水 1 L; 琼脂 20 g; HCl 调节到 pH4。

( 2) 无氮源基础培养基: 培养基( 1) 中的 3 g NaNO 3 改用 20 g 葡萄糖。

( 3) BC 培养基: 麦芽汁琼脂与马铃薯汁葡萄糖琼脂培养基等量混合。

( 4) 马铃薯汁葡萄糖琼脂培养基( PDA) : 按常法制备。

以上培养基均在 121杀菌 20 min。

1.3生理试验培养方法

在无碳源基础培养基中分别加入各种碳源, 或在无氮源基础培养基加入各种氮源的平皿中, 在温度( 20- 2)  培养 10 d, 每天观察菌体的生长状态。
1-4 形态观察方法在不同培养基的培养过程中, 观察菌体发育状况, 巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒并用显微摄影仪拍摄菌体形态。

2、结果与讨论

2.1灰葡萄孢生理特征

2.1.1碳源利用

实验对象为 3 株灰葡萄孢, 编号分别为 BC1、 BC2 和 BC3, 将 3 株灰葡萄孢分别培养在加入不同碳源的无碳基础培养基( 1) 的平皿上, 结果发现 3 株菌具有不同的生理特征。其中菌株 BC2 能够利用的碳源种类较多, 巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒在同样培养条件下的生长优势也很明显。BC2除了不能同化 D- 甘露糖之外, 对表 2 中所列出碳源都能在不同的程度上加以利用。这 3 株灰葡萄孢都能很好地利用葡萄糖、 果酸、 酒石酸、 柠檬酸和苹果酸。对于它们来说, 这几种碳源的优劣次序为酒石酸> 苹果酸> 柠檬酸> 葡萄糖> 果糖。这种优先利用有机酸的情况是灰葡萄孢的重要特征。这 3 株菌均不能利用甘露糖, 对于淀粉和其他它糖类的利用能力也很差。

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