盐析法纯化免疫球蛋白技术分析 

(一)　原理 
蛋白质在水溶液中的溶解度轮状病毒Elisa试剂盒是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。 
(二)　盐析的操作步骤 
轮状病毒Elisa试剂盒取正常人混合血清加等量生理盐水，于搅拌下逐滴加入与 
稀释血清等量的饱和硫酸铵

(三)　主要材料 
1.　试剂: 
(1)　正常人混合血清；灭菌生理盐水。 
(2)　饱和硫酸铵溶液的配制: 
称(NH4)2SO4(AR)400～425克，以50～80℃之蒸馏水500ml溶解，搅拌20分钟，趁热过滤。冷却后以浓氨水(15N　NH4OH)调PH至7.4。配制好的饱和硫酸铵，瓶底应有结晶析出。 
(3)　萘氏试剂配制： 
称HgI11.5克，KI8克，加蒸馏水至50ml，搅拌溶解后，再加入20％NaOH 50ml。 
(4)　0.02M, PH7.4磷酸盐缓冲盐液(Phosphate Buffered Saline PBS)配制: 
贮存液: 
A液：0.2M Na2HPO4：Na2HPO4·12H2O 71.64克，加蒸馏水至1000ml； 
B液: 0.2M NaH2P4：NaH2P4·2H２O 3.12克，加蒸馏水至1000ml； 
应用液：取A液81ml加B液19ml混合，再以生理盐水作10倍稀释即成。 
(5)　0.1M, PH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer PB)配制: 
将上述A液取81ml与B液19ml混合，再以蒸馏水对倍稀释即成。 
(6)　20％磺基水杨酸。 
2.　器材: 
轮状病毒Elisa试剂盒普通冰箱、离心机、电磁搅拌器，751桮型紫外分光光度计、扭力天平，粗天平。 
透析袋、尼龙绳、细竹棒、精密PH试纸(PH5.5～9.0)、眼科镊子、小剪刀。 
烧杯、量筒、吸管、滴管、灭菌小瓶、试管等。