巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒检测ABA的含量
巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中,在今天的文章中,将为大家介绍如何用ELISA方法去检测ABA的含量!
先将ABA蛋白质复合物与固相载体(聚苯乙烯微量滴定板)结合,然后将待测的ABA(样品或标准品)和兔抗ABA抗体加入微量滴定板的孔中,进行竞争反应,接着弃去上清液,洗涤固相表面,加入酶标二抗使其与结合在固相ABA上的抗体反应,zui后去除多余的未反应的酶标二抗,测定与固相结合的酶活性,酶活性和待测ABA含量呈负函数关系,即固相ABA结合的抗体与酶标二抗量(OD或B%)随待测ABA含量增加而减少,以一系列已知浓度的ABA的OD值制图而获得标准竞争性抑制曲线,对于未知样品B,只要在同样条件下测定反应后的OD值,就可以从标准曲线上查到ABA的量。
测定方法
1.包被:在微量滴定板内准确加入100μLABA包被液,37℃湿盒过夜。
2.标样稀释?:取8支试管每管加150μLDB,*管中加入50μL(2000ng/50μL)标准液,充分涡旋后,取50μL至第二号管中,同样涡旋后,取50μL到第三管;依次稀释到第六管,稀释后的标准ABA依次为1000ng、500ng、250ng、125ng、62.5ng、31.25ng、15.625ng、7.8125ng/50μL。
3. 洗板:从37℃湿盒中取出滴定板,恢复到室温后,弃去包被液,用WB(洗涤缓冲液)洗涤三次,甩干(吸水纸)。
4.加样:1~8孔对应加入ABA标样50μL,10号孔相应加入zui浓ABA标样,9号孔加50μLDB,三排重复;然后每孔加50μL抗体,37℃ 45分钟。
5.洗板:
6.加酶标二抗:每孔加100μL,37℃反应1小时。
7.洗板:
8.显色:各孔加10μLOPD显色液,37℃ 20分钟。
9.巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒终止反应:各孔加50μL 6NH2SO4。
303-98-0 辅酶 Q10环境标准品 25mg
30806-86-1 相关物质B标准品 25mg
31055-19-3 相关物质E标准品 25mg
3147-75-9 紫外线吸收剂UV-329标准品 25mg
315-69-5 曲米帕明标准品 25mg
321571-07-7 相关物质F标准品 25mg
33288-71-0 美比达相关物质A标准品 25mg
4097-22-7 地丹诺辛相关物质B标准品 25mg
42017-89-0 相关物质B标准品 25mg
42019-78-3 相关物质A标准品 25mg
巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒
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