腺病毒型PCR试剂盒的PCR反应体系配制
点击次数:952 更新时间:2020-05-21
腺病毒型PCR试剂盒的PCR反应体系配制:
注:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a)模板使用量:进行基因组上的目的片段检测,建议使用少量的血液量作为模板;检测血液样本中某种病毒或细菌等的目的片段,建议扩大PCR体系并使用较大量的血液模板。血液模板zui多占PCR体系的45%(人血)、20%(鼠血)。若模板使用含有血液的采集卡,可截取直径1-4 mm的血点,直接加入20-50 μL PCR反应体系进行扩增。
b)引物浓度:通常引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-0.5 μM之间进行调整。
c)反应体系:使用20 μL或 50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
d)体系配制:配制好PCR反应体系,置于涡旋仪上涡旋混匀,瞬时离心将反应液集于管底。
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