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人可溶性CD40配体(sCD40L)免疫组化试剂盒​操作步骤

点击次数:526 更新时间:2021-11-11

人可溶性CD40配体(sCD40L)免疫组化试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

BAF53b肌动蛋白样蛋白6B抗体

Ataxin 7脊髓小脑共济失调蛋白7抗体

phospho-c-Abl (Tyr70)磷酸化非受体激酶c-Abl抗体

APBA1β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(X11α)

Apolipoprotein E载脂蛋白E抗体

AFP甲胎蛋白AFP抗体

AE2阴离子交换蛋白2抗体

Aconitase 1铁调节蛋白1抗体

ATAD3A三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体

APOJ载脂蛋白J抗体

APOH载脂蛋白H抗体

ART4二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体

AKIRIN2AKIRIN2蛋白抗体

ARL8BADP核糖基化样因子8B抗体

ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体

AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗体

ASZ1锚定蛋白样蛋白1抗体

Adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗体

AIM1L黑色素瘤缺失样蛋白1抗体

AER61未知糖基化转移酶AER61抗体

FE65铁蛋白Fe65抗体

ARHI抑癌基因ras同源家族1抗体

AP2 alpha转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体

ANP心钠素抗体

AARS2丙氨酰tRNA合成酶2抗体

AKAP12抑制蛋白激酶C底物抗体

Alpha-Synuclein核突触蛋白α抗体

APG4B自噬相关蛋白4B抗体

ADAMTS12整合素样金属蛋白酶与1型-12抗体

alpha Actinin 4-Loading Controlα-辅肌动蛋白4(内参)抗体

Alkaline Phosphatase碱性磷酸酶抗体

AU1 tagAU1 tag标签抗体

AEBP1脂肪细胞增强结合蛋白1

AKT1蛋白激酶B

AKT1蛋白激酶B

ANGL2血管生成素样蛋白2抗体

Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗体

Annexin I膜粘连蛋白 I抗体


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