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活化T-细胞核因子2(NFATC2)ELISA试剂盒​操作步骤

点击次数:480 更新时间:2021-11-18

活化T-细胞核因子2(NFATC2)ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠(mouse cAMP)

小鼠环磷酸鸟苷(mouse cGMP)

小鼠睫状神经营养因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配体(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mouse sCD40L)

小鼠补体C3a(mouse C3a)

小鼠补体C5a(mouse C5a)

小鼠血清总补体(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羟甲基赖氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌钙蛋白T

小鼠粒细胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠(mouse Cytochrome C)

小鼠双链DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚体(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β内啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生长因子(mouse EGF)

小鼠表皮生长因子受体(mouse EGF R)

小鼠内皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒细胞趋化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促红细胞生成素(mouse EPO)


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