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血管活性肽酶抑制剂(VPI)检测试剂盒操作步骤

点击次数:944 更新时间:2022-03-01

血管活性肽酶抑制剂(VPI)检测试剂盒操作步骤:

实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1.         加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.         弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加标记抗体工作液100μl(取1μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3.         温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。

5.         温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.         依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

转录因子E2F-1抗体

内皮素转化酶1抗体

细胞外基质蛋白1抗体

外胚层发育不良抗体

E2 tag标签抗体

铁螯合酶抗体

DH5α大肠杆菌菌体蛋白抗体

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

上皮细胞粘附分子抗体

表皮生长因子抗体

表皮生长因子受体3抗体

上皮钙粘附分子抗体

红细胞生成素受体抗体

脑啡肽抗体

EID2蛋白抗体

上皮细胞粘附分子抗体

红细胞膜相关蛋白ERMAP抗体

腺样癌特异性相关抗原抗体EMC1抗体

腺样癌特异性相关抗原抗体EMC1抗体

染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1抗体


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