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常见的ELISA常见技术指南

点击次数:646次 更新时间:2017-03-13

巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒经验技术是很重要的,常见的ELISA常见技术指南:
1.选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
2.ELISA实验中为了确定信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
3.标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
4.一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
5.为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
6.若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
7.当测定混合液体中的抗原时,如血清,巨噬细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒建议在标本稀释液中加不相干的Ig。

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