1．17羟孕酮Elisa试剂盒固相载体的选择

    载体的种类很多，其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。

    聚苯乙烯凹孔板是应用zui广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作简便、用量小，适于大批检查。

    由于聚苯乙烯的工艺过程不够稳定,造成各批次差异较大。所以进行ELISA之前，必须进行筛选。

检查方法：

⑴ 吸附性能的检查：先加抗体包被，然后加入同一稀释度的酶标抗体，zui后加底物、显色、测OD值,求出总平均OD值,再求出每相邻两孔的OD平均值,此均值在总均值的±10%以内为合格,若中间孔与四周孔OD值相差太大，或一侧与另一侧孔OD值相差较大均属不合格。

⑵ 对比测定阳性血清与阴性血清，观察是否存在明显差异，若二者OD值相差于10倍以上者为合格。

    板的处理。新板一般不用处理,用蒸馏水冲洗即可应用。板用一次即废。但不少实验工作者认为用超声波处理，清洁液Tritonx100、20%乙二醇处理仍可应用。但发现空白对照显色较深和阳性样品显色结果不理想时，应弃去不用。

2．载体的吸附条件

    载体的吸附均为物理吸附。吸附的多少取决于PH值、温度、蛋白浓度、离子强度以及吸附时间等。

    较好的吸附条件是：离子强度为0.05Mol/L～0.10Mol/L，pH9.0～pH9.6碳酸盐缓冲液，蛋白浓度为1μg/ml~100μg/ml，4℃过ye或37℃3h。

3．酶标抗体使用浓度的确定

    于聚苯乙烯板孔中加足够量的抗体包被,温育一定时间，冲洗、把酶标结合物倍比稀释，每个稀释度加2孔,温育、冲洗、再加底物显色、比色。以OD值为纵坐标,酶标结合物的稀释度为横坐标，制作曲线。找出OD值为1时，相对应的酶标抗体稀释度为zui适酶标抗体稀释度。

    这个稀释度是指在这种条件下的zui适稀释度，换个条件就不是zui适的了。如1：400的酶标抗体稀释度温育6h可与1：6 400稀释度温育24h结果相同。所以一旦条件确定之后，就不要变更，以保证结果的重复性和相对的准确性。

    此zui适酶标抗体稀释度可做为工作浓度，17羟孕酮Elisa试剂盒也可提高半个至一个滴度，但不能提高过高，否则非特异性显色增加。

    酶标抗体的滴度反映酶标抗体的质量，也可以此比较酶标结合物的优劣。有材料报道认为1：320滴度为合格,1：1 000以上更好。酶标抗体滴度越高，用于工作浓度的稀释倍数就越大，敏感性就越高，非特异性反应就越低。
纯度：    牛七碱            Szechenyine    ≥98%        
纯度：    派利文碱    Perivine    ≥98%        
纯度：    七叶苷    Esculin    ≥98%
纯度：    漆黄素            Fisetin    ≥98%        
纯度：    羟基酪醇    Hydroxytyrosol    ≥97%        
纯度：    羟基吴茱萸碱    Hydroxyevodiamine    ≥98%        
纯度：    茄尼醇    Solanesol    98%
纯度：    芹菜苷元            Apigenin    ≥98%        
纯度：    芹黄素            Apigenin    ≥98%        
纯度：    秦艽甲素    Gentiannine    ≥95%
纯度：    秦皮苷            Fraxin    ≥98%        
纯度：    秦皮乙素            Aesculetin    ≥98%        
纯度：    青阳参苷元            Qingyangshengenin    ≥98%        
纯度：    人参苷元F11        Aglycone F11    ≥97%
纯度：    鞣花酸    Ellagic acid    95% 98%
17羟孕酮Elisa试剂盒