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D2D Elisa 试剂盒常压灭菌操作要点

点击次数:613次 更新时间:2019-06-16

   D2D Elisa 试剂盒在的实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。如双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法测IgM抗体、应用亲和素和的ELISA。

  D2D Elisa 试剂盒以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
  应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
  D2D Elisa 试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品的浓度。
  D2D Elisa 试剂盒常压灭菌操作要点:
  (1)进锅不挤压:摆放待灭菌的菌种袋必须分层,每层菌种袋不可摆太挤,要留一定空隙,不能相互挤压。不适宜将菌种袋卧叠,要分层立放,以保证蒸汽畅流和接种穴完好。为了避免棉塞易潮湿,可在棉塞上盖一层薄膜或油纸,但覆盖物不可太大,否则会影响上下层蒸汽畅流;也可将4个菌种袋的棉塞并拢,棉塞向下一同塞到4个菌种袋的空隙中,这样塑料袋规格要加长,但防潮效果良好。
  (2)及时灭菌:随装随灭。配料到灭菌间隔时间越短越好,以免杂菌自繁。大规模时,要分锅灭菌。
  (3)攻头:指开始灭菌时要大火猛烧。从开始灭菌到温度达100℃,历时越短越好,zui多不能超过2小时,以免长时间高温高湿造成杂菌自繁。当然,要做到这一点还取决于灭菌锅的保温保气性能。
  (4)控中间:指锅体下部温度达到100~C后,控制火势烧稳火,维持8~10小时。此间,温度不可回落,灭菌操作者要坚守岗位,不能因通宵灭菌、疲劳或其他原因而懈怠,引起温度回落。另外,常压灭菌为了避免烧干应注意及时向蒸发锅内补充水,但补水不能造成锅内水停止沸腾,可考虑补充沸水或微量连续补水。可见,要想节省燃料,又要做到上述这些,建造一个保温、保汽性能良好的灭菌锅十分重要。
  (5)保尾:指灭菌结束前要再一次大火猛烧。目的在于加大蒸汽量,灭菌结束后打开柜门时有大量蒸汽冒出,带走棉塞湿气。但此时要将连体灭菌锅中蒸发锅内的水排干。在开门时先将门拉开一条缝隙散气,烘干棉塞,避免冷热接触产生冷凝水使棉塞受潮。
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