浅谈减少E2定量elisa 试剂盒实验误差的小窍门
点击次数：788次 更新时间：2020-07-17
E2定量elisa 试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。下文来讲讲elisa试剂盒在使用时的安全事项。
使用E2定量elisa 试剂盒的安全事项：
1、避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2、应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
3、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
8、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
9、加入elisa试剂盒的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
10、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
在日常的E2定量elisa 试剂盒实验操作中，难免会遇到一些误差，这些误差有偶然误差、过失误差、系统误差，而一个小小的误差主意能够影响到实验，那么怎样才能缩小实验误差呢？下面主要就简单介绍一下吧。
1、检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械，具有一定总结和分析问题的能力，对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。
2、使用校对过的微量移液器，排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。
3、评估试剂的实用性，试剂的稳定与否，对准确率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品反复比照试验，判定试剂符合要求后方可使用。
4、仔细阅读说明书，严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方，反复试验确定成立后才能改进。
5、洗涤*，如若洗板不*，酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜，现用现配，陈旧的洗涤液会出现本底增高现象，也可能出现假阳性。
6、严控反应时间，反应时间过长，酶失活；反应时间过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物结构松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假阴性。
7、注意试剂盒保存期，过保存期的试剂不能使用。
8、加样要准确、快速。如果加样不准确，酶生成物的量不能确定，直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关，所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验，如果加样迟缓，便出现误差，而且试剂长时间暴露在外，E2定量elisa 试剂盒尤其室温过高时，保存期会缩短甚至失效。
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