细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒实验的准备和反应步骤
点击次数：606次 更新时间：2020-09-17
细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒实验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒的准备：
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温，试剂不能直接在37oC溶解。
2、标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，依次倍比稀释成不同的梯度，标准品稀释液直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3、浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
细胞炎性蛋白2Elisa试剂盒反应步骤：
（1）严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
（2）加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
（3）封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。
（4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。
（5）合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
（6）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
（7）显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
（8）加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
（9）应保证酶标板清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至低限度。ELISA试剂盒豚鼠从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
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