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为您介绍下白三烯D4Elisa试剂盒的实验要点

点击次数:75次 发布时间:2020-10-16

  为您介绍下白三烯D4Elisa试剂盒的实验要点
  ELISA是Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay的简称,即酶联免疫吸附测定,是研究蛋白抗体的重要方法。它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶进行直接或间接结合,然后通过酶与底物产生颜色反应,进行定性和定量分析。ELISA大致分为五种类型:直接法、间接法、竞争法、夹心法、捕获包被法。在商品化试剂盒中用得比较多的是双抗体夹心法、竞争法和间接法。
  要做ELISA实验就少不了试剂盒,下面我们就以白三烯D4Elisa试剂盒为例,为大家介绍一下。
  白三烯D4Elisa试剂盒除正常试验外,还需注意这几个要点
  1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
  2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
  3、试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
  4、加样:加样时,要控制加样速度,避免*孔与zui后一孔之见的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性;一般加样时间控制在10分钟内,如果样本数量过多,可使用多道移液器。
  5、孵育:样品要在密闭的容器内进行孵育,严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
  6、洗涤:洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,同时要消除板底残留的液体和手指痕迹,避免影响zui后的酶标仪读数。
  7、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,10分钟左右),如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
  8、建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
  9、建议使用白三烯D4Elisa试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
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