公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
急性单核细胞白血病细胞;J-111 | 贴壁生长 | EY-X63462 |
细胞名称 急性单核细胞白血病细胞;J-111
形态特性: 淋巴母细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性:
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法:
传代情况: 不详
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
rmTrypsin 3, CF (10 UG)细胞
靛蓝二磺酸钠ATP2A1/SERCA1 (L24) Antibody羟基-甲酸
变色酸钠,铬变酸二钠HMGCS1 (D1Q9D) Rabbit mAb氟-三氟酚
溴百里酚蓝钠盐Phospho-Tie2 (Tyr992) Antibody衣康酸二甲酯
特地唑游离CDC37 (D28H7) Rabbit mAbN,N-二酰
水合;三Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb ( Specific)聚氧氢化
对二甲氨基甲 (DMAB)Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb ( Specific)2-基呋喃
特地唑;特地唑酸酯Tie2 (AB33) Mouse mAb硅藻土
酚红钠盐Phospho-Tie2 (Ser1119) Antibody氧基椰油烷基
甲基-2-并噻唑酮腙盐酸盐,水合β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)N,N'-二甲基-1,2-环己二
赤藓红;赤藓红B钠盐Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody顺式-羟基-L-
达拉菲尼,达帕菲尼Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody3,5-二溴甲酸
安赛蜜;AK糖Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody甲酸甲酯
酰柠檬酸三丁酯NaPi2b/SLC34A2 (D6W2G) Rabbit mAbSOLUTOL HS 15
酰柠檬酸三酯Dexras1 Antibody2-溴-4'-酮
海藻酸nNOS (C7D7) Rabbit mAb对溴甲酸甲酯
棕榈酸酯/L-抗坏血酸棕榈酸酯EI24 (D3F6Z) Rabbit mAb氨基甲酸甲酯
阿斯巴甜Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)对甲酸甲酯
克拉维酸Fas (C18C12) Rabbit mAb肼基甲酸
刺槐素Fas (C18C12) Rabbit mAb对氧基甲酸
盐酸安非他酮Receptor Tyrosine Kinase Antibody Sampler Kit基酚
左旋氨地平/磺酸左旋氨地平nNOS Antibody
左旋氨地平/磺酸左旋氨地平(标准品)NG2 Antibody三氟磺酸锡
曲尼司特nNOS (C12H1) Rabbit mAbDL-对
曲尼司特(标准品)Bcl10 (C78F1) Rabbit mAb1,3,5-*氧基
(标准品)STAG2 Antibody异酸间甲酯
CD27 (O323) Mouse mAb (APC Conjuga)羟基
D-Tom20 (D8T4N) Rabbit mAb羟基-甲氧基甲
依度沙班;伊多塞班TFEB Antibody缩二
牛防风素;6-甲氧基当归素CHD3 Antibody肉桂酰
6-羟基(标准品)CHD3 Antibody肉桂酸
6-羟基Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAb哌啶
甘氨石胆酸(GLCA)Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAbN(α)-Z-D-2,二氨基酸
N-异基酰(含稳定剂MEHQ)BCL6 Antibody三间基基膦
匹卡米隆Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody1-(*基硅基)炔
双酸钠Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody5-甲基异恶唑-甲
L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰一水合物CHD4 Antibody氨基-氟酚 癌细胞;OS-RC-2 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
急性单核细胞白血病细胞;J-111人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)ELISA试剂盒MACELISAKit产品规格:48T/96T。
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒M-AChRELISAKit产品规格:48T/96T。
人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒MAFELISAKit产品规格:48T/96T。
人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒MAGEELISAKit产品规格:48T/96T。
人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒MAGELISAKit产品规格:48T/96T。
人蛋白S(ProteinS)ELISA试剂盒mammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit产品规格:48T/96T。
人蛋白Z(ProteinZ)ELISA试剂盒MAOELISAKit产品规格:48T/96T。
人活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒MAP-2ELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。