产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、巨噬细胞上清液中的巨噬细胞移动抑制因子（MIF）蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于免疫调控、炎症反应及肿瘤微环境研究等领域。
产品名称：大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa试剂盒
英文名称：MIF ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-5740E
检测原理：
大鼠巨噬细胞移动抑制因子 (MIF) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗大鼠 MIF 抗体。
结合：加入标准品或样本，MIF 被固相抗体捕获。
检测：加入生物su化的抗大鼠 MIF 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1.试剂提前室温平衡 30 min，浓缩洗涤液按说明书稀释配制。
2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔，精准加样后封板。
3.37℃恒温孵育结合反应，结束后弃孔内液体拍干。
4.加满洗涤液浸泡清洗，重复洗板 3–5 次，去除未结合杂质。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶结合物，再次 37℃温育。
6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体，保证背景干净。
7.依次加入显色液避光显色，待梯度蓝色清晰显现。
8.加入终止液终止反应，颜色由蓝转黄，即刻用酶标仪读取 OD 值。
9.根据标准曲线拟合计算，得出样本目标物质浓度。
