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产品名称:
前列腺上皮细胞;RWPE-1
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前列腺上皮细胞;RWPE-1相关产品:
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  前列腺上皮细胞;RWPE-1的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

前列腺上皮细胞;RWPE-1

贴壁生长

EY-X63649

细胞名称  前列腺上皮细胞;RWPE-1
形态特性: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞1996年由WebberMM建立。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:3传代,2-3天传一代

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
1-Methoxycarbonyl-β-carboline

CAS No.:3464-66-2

中文名:

分子式:C13H10N2O2

牛大力(美丽崖豆藤) 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 2g

(P) 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 3支/套,0.5ml/支

啤酒酵母菌 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 冻干粉

阿莫林系统适用性对照品 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 30mg

甘双唑 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 100mg/支

醋己锌 订购|咨询  骨桥素(OPN) 规格: 100mg

醋纤维素 订购|咨询  骨调蛋白(OMD) 规格: 200mg

红花 订购|咨询  骨粘连蛋白(ON) 规格: 0.5g

那唑 订购|咨询  骨粘连蛋白(ON) 规格: 50mg

订购|咨询  骨粘连蛋白(ON) 规格: 50mg

山柰 订购|咨询  骨膜蛋白(POSTN) 规格: 0.5g

订购|咨询  骨膜蛋白(POSTN) 规格: 20mg

绿萍 订购|咨询  骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1) 规格: 2g

阿利坦酯杂质C 订购|咨询  骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1) 规格: 20mg

订购|咨询  骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 500mg

杠柳苷 订购|咨询  骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 20mg/支

甜菜 订购|咨询  骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 50mg

鞣小檗 订购|咨询  骨骼肌特异性受体酪激酶(MUSK) 规格: 50mg

CTBP2  C末端结合蛋白2抗体    现货供应 0.1ml Lapatinib base

PTGER1  前列腺素EP1受体抗体    现货供应 0.1ml Levonorgestrel

phosphoPLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17)  心脏蛋白抗体    现货供应 0.1ml Levonorgestrel

ASM/Acid sphingomyelinase  性神经鞘脂酶抗体    现货供应 0.1ml Levosulpiride

IL1 Beta/IL1B  白介素1β抗体    现货供应 0.1ml Levosulpiride

BFAR/RNF47  环指蛋白47抗体    现货供应 0.2ml Levothyroxine Sodium

WISP1  Wnt1信号通路蛋白1抗体    现货供应 0.2ml Lidocaine

Annexin A8  膜粘连蛋白8抗体    现货供应 0.1ml Lidocaine

卡波树脂  进口、国产  英文名称:PolyacrylicresinⅢ  含量:AR,98%

卡芥  进口、国产  英文名称:BU  含量:亲合层析纯,1.95ug/ml

卡尔费休试剂(含吡啶)  进口、国产  英文名称:KarlFlscherreagent  含量:BR,94%

卡拉胶类型III  进口、国产  英文名称:KCarrageenanKarraType  含量:AR,98%

卡拉胶类型V  进口、国产  英文名称:ICarrageenanIOTAType  含量:BR,98%

卡氏试液  进口、国产  英文名称:KarlFlscherreagent  含量:CP,99%

抗坏血  进口、国产  英文名称:VC  含量:显色剂,80%

 进口、国产  英文名称:Zeocin  含量:USP级,900050mcg/mg

抗痛素  进口、国产  英文名称:Antipaindihydrochloride  含量:生物技术级,600u/mg

 进口、国产  英文名称:Scandiumoxide  含量:BR,98%
前列腺上皮细胞;RWPE-1标准II号营养琼脂规格:250g用途:细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用

*琼脂培养基规格:250g用途:用于纺织品微真菌影响评价试验

沙氏琼脂培养基规格:BR250g详情介绍

L-规格:10g用途:微生物指示剂

麦康凯琼脂(MAC)规格:250g用途:用于肠道致病菌的选择性分离培养

琼脂培养基J规格:250g用途:用于沙门氏菌选择性分离培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 前列腺上皮细胞 RWPE-1
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