公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
前列腺上皮细胞;RWPE-1 | 贴壁生长 | EY-X63649 |
细胞名称 前列腺上皮细胞;RWPE-1
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞1996年由WebberMM建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
1-Methoxycarbonyl-β-carboline
CAS No.:3464-66-2
中文名:
分子式:C13H10N2O2
牛大力(美丽崖豆藤) 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 2g
孕(P) 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 3支/套,0.5ml/支
啤酒酵母菌 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 冻干粉
阿莫林系统适用性对照品 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 30mg
甘双唑 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 100mg/支
醋己锌 订购|咨询 骨桥素(OPN) 规格: 100mg
醋纤维素 订购|咨询 骨调蛋白(OMD) 规格: 200mg
红花 订购|咨询 骨粘连蛋白(ON) 规格: 0.5g
那唑 订购|咨询 骨粘连蛋白(ON) 规格: 50mg
订购|咨询 骨粘连蛋白(ON) 规格: 50mg
山柰 订购|咨询 骨膜蛋白(POSTN) 规格: 0.5g
甾 订购|咨询 骨膜蛋白(POSTN) 规格: 20mg
绿萍 订购|咨询 骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1) 规格: 2g
阿利坦酯杂质C 订购|咨询 骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1) 规格: 20mg
订购|咨询 骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 500mg
杠柳苷 订购|咨询 骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 20mg/支
甜菜 订购|咨询 骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2) 规格: 50mg
鞣小檗 订购|咨询 骨骼肌特异性受体酪激酶(MUSK) 规格: 50mg
CTBP2 C末端结合蛋白2抗体 现货供应 0.1ml Lapatinib base
PTGER1 前列腺素EP1受体抗体 现货供应 0.1ml Levonorgestrel
phosphoPLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 心脏蛋白抗体 现货供应 0.1ml Levonorgestrel
ASM/Acid sphingomyelinase 性神经鞘脂酶抗体 现货供应 0.1ml Levosulpiride
IL1 Beta/IL1B 白介素1β抗体 现货供应 0.1ml Levosulpiride
BFAR/RNF47 环指蛋白47抗体 现货供应 0.2ml Levothyroxine Sodium
WISP1 Wnt1信号通路蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Lidocaine
Annexin A8 膜粘连蛋白8抗体 现货供应 0.1ml Lidocaine
卡波树脂 进口、国产 英文名称:PolyacrylicresinⅢ 含量:AR,98%
卡芥 进口、国产 英文名称:BU 含量:亲合层析纯,1.95ug/ml
卡尔费休试剂(含吡啶) 进口、国产 英文名称:KarlFlscherreagent 含量:BR,94%
卡拉胶类型III 进口、国产 英文名称:KCarrageenanKarraType 含量:AR,98%
卡拉胶类型V 进口、国产 英文名称:ICarrageenanIOTAType 含量:BR,98%
卡氏试液 进口、国产 英文名称:KarlFlscherreagent 含量:CP,99%
抗坏血 进口、国产 英文名称:VC 含量:显色剂,80%
抗 进口、国产 英文名称:Zeocin 含量:USP级,900050mcg/mg
抗痛素 进口、国产 英文名称:Antipaindihydrochloride 含量:生物技术级,600u/mg
钪 进口、国产 英文名称:Scandiumoxide 含量:BR,98%
前列腺上皮细胞;RWPE-1标准II号营养琼脂规格:250g用途:细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用
*琼脂培养基规格:250g用途:用于纺织品微真菌影响评价试验
沙氏琼脂培养基规格:BR250g详情介绍
L-规格:10g用途:微生物指示剂
麦康凯琼脂(MAC)规格:250g用途:用于肠道致病菌的选择性分离培养
琼脂培养基J规格:250g用途:用于沙门氏菌选择性分离培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。