产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆中的抗酒石酸酸性磷酸酶 5b（TRACP-5b）蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于骨吸收、骨质疏松症及骨代谢疾病研究等领域。
产品名称：大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5belisa试剂盒
英文名称：TRACP-5b ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-5725E
检测原理：
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 5b (TRACP-5b) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗大鼠 TRACP-5b 抗体。
结合：加入标准品或样本，TRACP-5b 被固相抗体捕获。
检测：加入生物su化的抗大鼠 TRACP-5b 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。
实验步骤：
试剂准备：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。
加检测抗体：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。
洗涤：同步骤3。
显色：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。
检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。
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操作步骤：
1.试剂平衡试剂盒室温平衡 30 min；浓缩洗涤液按说明书稀释混匀。
2.设孔加样设空白、标准品、待测样品孔，精准加样，封板。
3.温育结合37℃孵育 30–60 min，弃液拍干。
4.洗板加满洗涤液浸泡，甩干拍干，重复3–5 次。
5.加酶结合物除空白孔外每孔加 HRP 标记液，封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗净未结合游离酶，控干残留液体。
7.显色避光加显色液 A/B，避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数加终止液变色稳定后，立刻酶标仪读 OD 值。
9.结果计算标准曲线拟合，换算样本浓度。
