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产品名称:
神经母细胞瘤细胞;IMR-32
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  神经母细胞瘤细胞;IMR-32的详细资料:

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产品名称

神经母细胞瘤细胞;IMR-32

生长特性

贴壁生长

货号

EY-X63434

细胞名称  神经母细胞瘤细胞;IMR-32
形态特性: 存在两种细胞类型,小的神经母细胞样细胞和大的透明成纤维样细胞

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立,来源于一名13月龄白人男婴腹部肿块,临床诊断为神经母细胞瘤,伴有极少部位的类器官样分化。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 维持细胞浓度在0.4~4×105cells/cm2之间,1:3~1:6传代,2~3天换液1次。

传代情况: C3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
Streptavidin Plates, 5 Pk (1 PK)细胞名称: 人Burkkit淋巴瘤细胞;Daudi RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Streptavidin Plates, 15 Pk (1 PK)细胞名称: 小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS RPMI1640(w/oHepes)10%CS

Streptavidin PE (100 TESTS)细胞名称: Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;250ug/mlG418

Streptavidin NL637 (0.5 ML)细胞名称: 人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Streptavidin NL557 (0.5 ML)细胞名称: 小鼠淋巴瘤细胞;EL4 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%HS

Streptavidin NL493 (0.5 ML)细胞名称: 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Streptavidin HRP 5 Pack (1 KT)细胞名称: 人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;100ug/mlZeocin

Streptavidin HRP (30 UL)细胞名称: 人十二脂肠腺癌;HuTu-80 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA

Streptavidin Fluorescein (30 UL)细胞名称: 大鼠肝细胞;IAR20 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)20%FBS

Streptavidin Ferrofluid (1 ML)细胞名称: 新生牛眼晶体上皮细胞;NBLE DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20~30%FBS

Streptavidin APC (100 TESTS)细胞名称: 小鼠前胃癌细胞;MFC RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Streptavidin AP (1 ML)细胞名称: 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Stop Solution (15 x 6 mL) (1 PK)细胞名称: 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW264.7[RAW264.7] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

StemXVivo SF T Base Media (250 ML)细胞名称: 兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF F12:Ham'sF12NutrientMixture5%FBS

StemXVivo SF NSC Exp Base Med (250 ML)细胞名称: 兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

StemXVivo SF DC Base Media (250 ML)细胞名称: 稳定表达EBNA1的人胚肾细胞;293E IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
神经母细胞瘤细胞;IMR-32猪白介素17(IL-17)ELISA试剂盒IL-2RELISAkit产品规格:48T/96T。

猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA试剂盒IL-2sRαELISAkit产品规格:48T/96T。

猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒IL-2sRαELISAkit产品规格:48T/96T。

猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒IL-2sRαELISAkit产品规格:48T/96T。

猪血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA试剂盒IL-2sRβELISAkit产品规格:48T/96T。

猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒IL-2sRβELISAkit产品规格:48T/96T。

猪凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒IL-2sRβELISAkit产品规格:48T/96T。

猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒IL-3ELISAKIT产品规格:48T/96T。

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