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马内皮素1ELISA检测试剂盒说明
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马内皮素1ELISA检测试剂盒说明是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
  马内皮素1ELISA检测试剂盒说明的详细资料:

马内皮素1ELISA检测试剂盒说明组成: 
1)结合物及标本的稀释液;
2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
3)酶标记的抗原或抗体(结合物);
4)酶的底物;
5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),elisa试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);
6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
操作流程示意:
 

以下是马内皮素1ELISA检测试剂盒说明的详细介绍:点击了解更多其它ELISA检测试剂盒
马内皮素1ELISA检测试剂盒说明产品别名:马内皮素1EDN1)ELISA检测试剂盒 价格低,质量有保证。产品种类多,主要包括:人,大鼠,小鼠,兔,猪,犬,鸡,猴,牛,马,植物等ELISA试剂盒 英文名称:Horse Endothelin-1,EDN1 ELISA kit  规格: 48T/96T

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马内皮素1ELISA检测试剂盒说明

Horse Endothelin-1,EDN1 ELISA kit

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操作步骤:
1马内皮素1ELISA检测试剂盒说明标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,依次进行稀释数倍。
2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。   
4
、配液:将30倍(48T 20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
7
、温育:操作同3
8、洗涤:操作同5
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后,立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 O.D. 值)。
10、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色10分钟.
11
、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
12、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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样本处理及要求:
1. 马内皮素1ELISA检测试剂盒说明血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.
7.
不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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