公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肝癌细胞；HepG2[HepG2] | 贴壁生长 | EY-X63237 |
细胞名称 肝癌细胞；HepG2[HepG2]
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体；该细胞具有3-羟基-3-甲酰还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS；1%NEAA
传代方法: 1:4~1：6传代；每周2次。
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
蟾蜍他灵;和蟾毒他灵(标准品)DKK1 (D5V6L) Rabbit mAb2,二硝基
蟾毒它灵(标准品)Phospho-MARK Family (Activation Loop) Antibody2-甲氧基-
黃尿酸RecQL1 (Q1N3) Mouse mAb衣康酸
舒巴坦酸JAKMIP1 Antibody甲基酸丁酯
舒巴坦酸(标准品)Cox1 Antibody二二甲基酸酯
沙蟾毒精(标准品)Cox2 Antibody溴异恶唑
坦西莫司,脂化物Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjuga)三基
联双酯(标准品)COX IV Antibody2-基-1-丁
联双酯RANK Antibody2-基丁
富马酸卢帕他定DOCK180 (C4C12) Rabbit mAb糠
富马酸卢帕他定(标准品)Mre11 (31H4) Rabbit mAb2-噻吩甲
正辛基*基,八烷基*基Mre11 (31H4) Rabbit mAb叔丁基
酮麝香(标准品)DNMT3B (E4I4O) Rabbit mAb (Mouse Specific)6-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯
甲酰基十字孢(PKC-412)N-WASP (30D10) Rabbit mAb基三硅烷
无水邻菲啰啉；1,10-菲罗啉N-WASP (30D10) Rabbit mAbN-Boc-2-哌啶甲酸
邻菲啰啉一水；1,10-菲罗啉一水COX IV (3E11) Rabbit mAb间硝基三氟甲
邻菲啰啉盐酸盐一水；1,10-菲罗啉盐酸盐COX IV (3E11) Rabbit mAb防染盐S
EDTA二钠, 二四酸二钠盐
肝癌细胞；HepG2[HepG2]小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒ALV-AGELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PA)ELISA试剂盒AMAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒AmAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒AmAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒AMAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。
小鼠过敏素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
