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产品名称:
肝癌细胞;HepG2HepG2
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肝癌细胞;HepG2[HepG2]相关产品:Avian Tenosynovitis Virus(ATV)禽腱鞘炎病毒探针法荧光定量
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  肝癌细胞;HepG2HepG2的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

肝癌细胞;HepG2[HepG2]

贴壁生长

EY-X63237

细胞名称  肝癌细胞;HepG2[HepG2]
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、结合蛋白;表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体;该细胞具有3-羟基-3-甲酰还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA

传代方法: 1:4~1:6传代;每周2次。

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

蟾蜍他灵;和蟾毒他灵(标准品)DKK1 (D5V6L) Rabbit mAb2,二硝基
蟾毒它灵(标准品)Phospho-MARK Family (Activation Loop) Antibody2-甲氧基-
黃尿酸RecQL1 (Q1N3) Mouse mAb衣康酸
舒巴坦酸JAKMIP1 Antibody甲基酸丁酯
舒巴坦酸(标准品)Cox1 Antibody二二甲基酸酯
沙蟾毒精(标准品)Cox2 Antibody溴异恶唑
坦西莫司,脂化物Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjuga)三基
联双酯(标准品)COX IV Antibody2-基-1-丁
联双酯RANK Antibody2-基丁
富马酸卢帕他定DOCK180 (C4C12) Rabbit mAb糠
富马酸卢帕他定(标准品)Mre11 (31H4) Rabbit mAb2-噻吩甲
正辛基*基,八烷基*基Mre11 (31H4) Rabbit mAb叔丁基
酮麝香(标准品)DNMT3B (E4I4O) Rabbit mAb (Mouse Specific)6-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯
甲酰基十字孢(PKC-412)N-WASP (30D10) Rabbit mAb基三硅烷
无水邻菲啰啉;1,10-菲罗啉N-WASP (30D10) Rabbit mAbN-Boc-2-哌啶甲酸
邻菲啰啉一水;1,10-菲罗啉一水COX IV (3E11) Rabbit mAb间硝基三氟甲
邻菲啰啉盐酸盐一水;1,10-菲罗啉盐酸盐COX IV (3E11) Rabbit mAb防染盐S
EDTA二钠, 二四酸二钠盐
肝癌细胞;HepG2[HepG2]小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒ALV-AGELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PA)ELISA试剂盒AMAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒AmAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒AmAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒AMAC-1ELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。

小鼠过敏素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒AMAELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

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