1．回温平衡：

   在加样之前约半小时左右，把试剂盒从冰箱中取出，放置在室温下进行平衡，平衡到用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。ELISA试剂盒

2．加样：

   取出相应数量的微孔板放置在板架上，然后再对板孔进行编号，再对需要稀释的抗体或酶标记物进行稀释。在板孔的前六个孔内分别加入标准品1-6，然后在剩下的板孔内加入样品分析液。然后再在每孔内加入其余需要加入的液体。盖上盖板膜以后小幅度振荡，然后放置在相应的环境中进行反应。如是25℃环境反应，则可放置在空调房内进行反应；如果是37℃环境下反应，则必须放置在37℃恒温培养箱里进行反应，如果是4℃环境下反应，则必须放置在2-8度冰箱里进行培养。

3．反应时间：

   尽量把时间控制在需要的反应时间，如果时间比较紧迫的话也可以把时间稍微延长几分钟，但不宜太长。显色时间可根据颜色深浅进行调整。ELISA试剂盒

4．洗板：

   把板内液体甩干，加入稀释好的洗液250ul/孔，静置10s或稍作振荡后甩掉孔内液体，再次加入洗液，以此重复3-4遍，洗完以后利用吸水纸把孔内液体充分拍干后进行下一步操作，如果孔内有气泡，则利用干净的枪头刺破。ELISA试剂盒

5 结束实验:

   把加样枪全部调到zui大量程,试剂盒放入冰箱,试管及离心管进行清洗,关闭不用的仪器.