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营养缺陷型的鉴定方法

点击次数:2036 更新时间:2016-01-20

(1)营养缺陷型菌株的鉴定 营养缺陷型的鉴定方法通常有以下两种:一个培养皿上加一种营养物质,测定许多缺陷型菌株对该种生长因子的缺陷情况;在同一培养皿上测定一种缺陷型菌株对许多生长因子的需求情况,称生长谱测定。ELISA试剂盒营养缺陷型菌株的鉴定步骤包括测定缺陷型菌株所需生长因子类别;测定缺陷型菌株在该大类中具体需要哪种生长因子;进一步用单一生长因子进行复证试验。

①缺陷型类别的测定通常以下列物质代表氨基酸、维生素、核酸碱基:氨基酸混合物、酪素水解物或蛋白胨代表氨基酸组;酵母浸出液,其中氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶都有;维生素混合物,代表维生素组;核酸碱基混合物或用酵母核酸(用o.1%碱水解液),代表嘌呤、嘧啶类。

    将待测微生物的菌悬液加到MM中制成平板,凝固后分别用圆滤纸片沾上以上四类物质,覆于平板标定的位置上,培养后观察滤纸片周围生长情况。根据出现混浊的生长圈可以初步确定缺陷型所需生长因子属于哪一大类。ELISA试剂盒

②缺陷型所需生长因子的测定通常采用分组测定法。即将21种氨基酸组合6组,每6种氨基酸归一组;或将15种维生素组台5组,每5种维生素归一组。将营养缺陷型菌株和基本培养基混合制成平板,把5组或6组生长因子直接点到同一平板上,或用滤纸片沾取覆于平板上。培养后观察生长圈,确定该营养缺陷型菌株缺陷的生长因子。

    上述方法是测定少数几个营养缺陷型菌株时常用的方法。如要测定几十个或上百个营养块陷型菌株时,可用在一个平皿中加一种或一组生长因子的方法。该法只能鉴别单缺菌株。如要鉴别双缺或多缺菌株,可以采用在每一培养肛中都缺一种生长因子的方法。ELISA试剂盒

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