T-2毒素测定ELISA试剂盒检查步骤

  T-2毒素主要影响血液，肝脏，肾脏，胰腺肌肉及淋巴细胞的功能，T-2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经性能障碍等。本试剂盒是应用ELISA技术的新一代真菌毒素检测产品，操纵时间短于60min，能zui大限度地减少操纵误差和工作强度。使用T2毒素试剂盒则能够快速而正确的分析样品中T2毒素残留，T2毒素（T2）是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。本ELISA试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原，样本中T2毒素和此抗原竞争T2毒素抗体，同时T2毒素抗体与酶标二抗相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关，与尺度曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中T2毒素的含量。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷冻。

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加标准品/样本50l到对应的微孔中，加入T2毒素酶标物50l/孔，再加入T2毒素抗试剂50l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300l/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

7、显色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15～20min。

8、测定：加入终止液50l/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。

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