胱抑素CElisa试剂盒测定方法比较
1、胱抑素CElisa试剂盒概述
胱抑素CElisa试剂盒在鸡蛋清中分离纯化得到高纯度的半蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitor ,CPI) ,后被命名为胱抑素C.它由122 个氨基酸组成,带正电荷,等位点为9.3,是一种碱性非糖化的低分子蛋白,相对分子质量为13300.胱抑素C 是半蛋白酶抑制剂家族中的一员,编码血清胱抑素 C的基因位于20 号染色体短臂,长约615kb,属于管家基因,能在所有有核细胞中以恒定的速率转录表达。胱抑素C 是一种分泌性蛋白,广泛存在于各种体液中,如脑脊液、唾液、尿液、精液等, 其中精液和脑脊液中的浓度zui高, 尿液中zui低[1],胱抑素C 能够自由通过肾小球, 并且由肾小管重吸收后降解,生理情况下几乎没有影响胱抑素C稳定的因素。胱抑素具有产生速率恒定、只能通过肾小球滤过排泄,在肾小管内*被重吸收降解[2],这一特点使得血清胱抑素 C成为引人注目的肾脏肾小球滤过率(glomerular filtration rate. GFR)的替代标志物。
2、胱抑素CElisa试剂盒测定
2.1 胱抑素CElisa试剂盒测定方法比较
胱抑素C的测定目前有单向免疫扩散法(RID)、放射免疫法(RIA)、时间分辨荧光免疫法( TRFIA)、酶免疫测定法( EIA)、乳胶颗粒增强免疫比浊法(PETIA)等。
从测定速度方面讲,RID法、RIA法、TRFIA法、ELISA法均较耗时,PETIA法则只需几分钟就可完成整个分析过程。从灵敏度而言,RID法zui差,而RIA法、TRFIA法、ELISA法均优于PETIA法。RIA法存在放射性污染,FTFIA法需要较贵的仪器,ELISA法无法适应临床大批量的标本的需求。PETIA法可实现自动化,虽检测灵敏度差些,但可达到150ug/L,远远底低于健康人的下限,可满足临床的要求[3].
2.2胱抑素CElisa试剂盒干扰因素分析
大量国内外文献报导血清胱抑素 C受影响因素较小,Gokkusu等认为其不受性别,肌肉量的变化和慢性炎症的影响是一种理想的内源性标志物[4],余洪立报导PETIA法测定血清胱抑素 C 当<150μmol/ L ,Hb < 112g/ L ,TG< 815mmol/ L时 ,结果不受干扰[3].
目前对文献报导血清胱抑素 C测定有影响的因素较少,Newman认为甾体类激素治疗可能对血清胱抑素 C测定有影响,但未说明有什么影响[5].向礼贤报导恶性肿瘤患者(如:结直肠癌)血清胱抑素 C可以升高,类风湿性关节炎用非甾体类抗炎药和抗风湿类药物治疗病人血清胱抑素 C水平升高[1].
3、胱抑素CElisa试剂盒临床应用
3.1胱抑素CElisa试剂盒在反映肾脏肾小球滤过率方面的应用
由于血清胱抑素 C以恒定速率释放入血,*从肾小球滤过,在肾小管中几乎全被吸收,上皮细胞将其*分解代谢,它既不返回血液循环,也不分泌至肾小管,只经肾脏排除,不受性别、饮食、炎症和体质量等因素的影响,因此反映GFR时具有*的优势。
3.2 在儿科疾病中的应用
由于小儿肌肉量少, 血肌酐(SCr )的测定结果很低, 致使SCr测定的度差, 因此, 4 岁以下儿童(SCr 的参考值2. 0——4. 0mg/ L) 难于通过用SCr 来测定有较小变化肾脏肾小球滤过率。另一方面, 1 岁以上儿童血清或血清胱抑素 C浓度已很稳定,近于成人水平。所以血清胱抑素 C是反映儿童GFR 受损的灵敏标记物,更适应儿童肾病患者的诊断。
3.3 在糖尿病中的应用
约三分之一的糖尿病患者发展为肾衰需要肾透析,必须以可靠的肾脏肾小球滤过率清除率来评价糖尿病患者的肾功能状况。临床通常以检测SCr来评估GFR ,而SCr对轻度的肾功能损伤缺乏足够的灵敏度并存在盲区,血清胱抑素 C能对轻度的肾功能损伤反应灵敏,并对检测GFR 有较好的相关性,所以在糖尿病患者中定期检测血清胱抑素 C可以动态观察病情的发展。
3.4 在中的应用
对于的病人很可能导致肾功能损害,因为药物对肾小管有一定的损伤,当肾功能受到损害时,药物更容易积蓄并导致多方面的毒副作用,因此对进行药物治疗的病人及时关注其肾脏功能的状况,以适当调整药物剂量。一些研究[1——3]一致地认为对病人检测血清胱抑素 C比检测SCr更有意义。
3.5 在心血管疾病中的应用[6]
胱抑素C 参与了心血管系统诸多的病理、生理过程,它的作用机制涉及抗炎、抑制酶原与激素前体的活性等,而且由于它产生的恒定性,有可能在某些心血管疾病中成为诊断与检测的分子指标。
3.6 在肾移植中的应用
肾脏肾小球滤过率可作为衡量急、慢性排斥对免疫抑制药物的肾毒性观察指标之一,用一敏感、可靠和简便的指标来检测GFR 的变化对移植肾患者是极为有效的诊断工具,而胱抑素 C 无疑是比肌酐更为敏感的GFR的检测指标。
3.7 在诊断肾源性胸水方面的应用
引起胸水的原因很多,如肾源性,肝源性,心源性,炎症,肿瘤及内分泌代谢等。从多种病因中鉴别出肾源性胸水往往比较困难。Donej等用同一种方法同时测定血清和胸水中的血清胱抑素 C的浓度,发现在漏出性胸水中,血清血清胱抑素 C和胸水血清胱抑素 C均明显升高,且两者比值接近1.0,为肾源性胸水(r=0.954),而非其他原因所致的胸水。肾功能不全患者合并胸水,若为渗出液,两者均明显升高,尿毒症性胸膜炎可能性大。两者比值很高或很低,可以排除肾源性胸水的诊断。
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