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17羟孕酮Elisa试剂盒试验前的准备

点击次数:892 更新时间:2017-07-25

17羟孕酮Elisa试剂盒试验初步前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37 溶解;试剂或样品时,均需充沛混匀,混匀时尽量防止起泡。试验前应猜想样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检查计划,计算时再乘以相应的稀释倍数。
ELISA试剂盒加样:分别设空白孔、规范孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ,余孔分别加规范品或待测样品100 ,留心不要有气泡,加样 时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,悄然晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37 温育2小时。为保证试验作用有效性,每次试验请运用新的规范品溶液。
每孔加检查溶液B工作液(临用前)100 ,加上覆膜,37 温育1小时。
弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同进程3。
每孔加底物溶液90 ,酶标板加上覆膜37 避光显色(反响时间操控在15-30分钟,当规范孔的前3-4孔有显着的梯度蓝色,后3-4孔梯度不显着时,即可间断)。
每孔加间断溶液50 ,间断反响,此时蓝色立转黄色。间断液的参加次序应尽量与底物液的参加次序一样。
ELISA试剂盒反响时间的操控:参加底物后请守时查询反响孔的色彩改动(比方,每隔10分钟),如色彩较深,请提早参加间断液间断反响,防止反响过强然后影响酶标仪光密度读数。
弃去液体,甩干,不用洗刷。每孔加检查溶液A工作液100 (临用前),酶标板加上覆膜,37 温育1小时。
弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大概400 /每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
17羟孕酮Elisa试剂盒当即用酶标仪在450nm波长丈量各孔的光密度(值)。
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