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17羟孕酮Elisa试剂盒利用中枢神系统纤维的再生

点击次数:620次 更新时间:2017-07-28

 17羟孕酮Elisa试剂盒利用中枢神系统纤维的再生:此法采用定量夹心酶联免疫技术。特异性抗体对于C7已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井和任何C7目前的固定抗体的约束。共轭的抗体特异于C7除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,显色成比例的量的初始步骤中的约束的C7。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。
1。准备好所有试剂,工作标准和样品。
2。请确定井数的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥剂,密封保鲜袋,将未使用的井在4°C的含量布局表
3。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时,在37℃下一盘布局记录标准和样品检测。
4。每孔中取出的液体,不洗。
5。向每孔中加入100μl抗体(1倍)。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时,在37℃下(抗体(1X)可能会出现混浊。预热至室温,轻轻混匀,直到出现均匀解决方案。)
6。吸液的各孔和洗涤,共洗涤三次重复该过程两次。洗净,每孔填充洗涤缓冲液(200μL)使用喷瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,静置2分钟,*清除液体的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗涤后,清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。
7。17羟孕酮Elisa试剂盒向每孔中加入100μl的HRP-抗蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一个新的粘接剂条。温育1小时,在37℃下
8。重复的愿望/洗涤过程中,在步骤6的5倍。
9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟,在37℃下避光
10。一站式解决方案,每孔加入底物,轻轻晃动酶标板,以确保充分混合。
11。在5分钟内,设置至450nm,使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正,设置为540nm或570nm处。在540nm或570nm波长在450nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450nm处未经修正读数直接,可能会比较高,不太准确。
标准品    英文名称:    Perphenazine    规格:    200mg    :    58-39-9 
标准品    英文名称:    Promethazine Hydrochloride     规格:    500mg    :    58-33-3 
标准品    英文名称:    Dipyridamole    规格:    200mg    :    58-32-2
盐酸去甲咪嗪标准品    英文名称:    Desipramine Hydrochloride    规格:    125mg    :    58-28-6
3标准品    英文名称:    Menadione (Vitamin K3)    规格:    200mg    :    58-27-5 
氯氮草标准品    英文名称:    Chlordiazepoxide CIV    规格:    200mg    :    58-25-3
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