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产品名称:
非小细胞肺癌细胞;NCI-H838
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  非小细胞肺癌细胞;NCI-H838的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

非小细胞肺癌细胞;NCI-H838

贴壁生长

EY-X63408

细胞名称  非小细胞肺癌细胞;NCI-H838
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞于1984年建系,源于一位59岁患有非小细胞肺癌的白人男性吸烟者,从患者淋巴结转移灶分离而来。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3~1:6传代;2~3天换液1次。

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
杂交瘤细胞株;HR00213-5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgG

稳定表达猪CD163分子的小鼠肺泡巨噬细胞细胞系;MH-SCD163形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-TACSTD2 Polyclonal Antibody

等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用N,N’-二环己基脲Human RBMX2 ELISA Kit
人鼻咽癌-红色+荧光素酶标记拉丁属名: Bacillus  subtilisN,N’-二环己基脲Human RBM39 ELISA Kit
人食管癌拉丁属名: Monascus purpureus3-氟-4-(三氟甲基)Human RBM28 ELISA Kit
β-tc-6小鼠胰岛素瘤胰岛β规格: 1ml甘油管1支,20ul质粒,一般次日下午3-氟-4-(三氟甲基)Human RBM4 ELISA Kit
人正常拉丁属名: Massilia  brevitalea2-溴代异丁酸叔丁酯Human RBM42 ELISA Kit
人正常皮肤拉丁属名: Streptomyces angustmyceticus2-溴代异丁酸叔丁酯Human RBM46 ELISA Kit
人口腔表皮样癌拉丁属名: Mrakia frigida2-溴代异丁酸叔丁酯Human RBM41 ELISA Kit
人骨髓横纹肌肉癌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用2,5-二溴苯磺酰氯Human RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit
人胸腺激酶缺陷系用途: 与大豆共生固氮良好。2,5-二溴苯磺酰氯Human RBM14 ELISA Kit
SV-40转化肺成纤维拉丁属名: Enterococcus2-甲氧基茴香硫Human RBM15 ELISA Kit
人口腔癌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用2-甲氧基茴香硫Human RASIP1 ELISA Kit
人前列腺正常拉丁属名: Oceanobacillus kimchiiN-Boc-N'-Cbz-L-赖氨酸Human RASAL2 ELISA Kit
急性淋巴用途: 微生物肥料N-Boc-N'-Cbz-L-赖氨酸Human RASSF4 ELISA Kit
胸膜积液B淋巴注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用N-Boc-L-赖氨酸甲酯盐酸盐Human RBBP6 ELISA Kit
人癌拉丁属名: Aspergillus  niger三异叉酮基膦Human RASEF ELISA Kit
人类胚胎干拉丁属名: Aeromicrobium  fastidiosum双十烷基二甲基Human RASGEF1A ELISA Kit
人诱导型多能干拉丁属名: Bacillus subtilis双十烷基二甲基Human RBBP8 ELISA Kit
脂肪来源人MSC人脂肪间充质干注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用2-氟-6-三氟甲基苄

非小细胞肺癌细胞;NCI-H838兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒IAAELISAKit产品规格:48T/96T。

兔血清总补体(CH50)ELISA试剂盒IAAELISAKit产品规格:48T/96T。

兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒IAPELISAKit产品规格:48T/96T。

(cAMP)ELISA试剂盒IAPELISAKit产品规格:48T/96T。

兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒IAPPELISAKit产品规格:48T/96T。

p物质(SP)ELISA试剂盒ICADELISAKit产品规格:48T/96T。

兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒ICAELISAKit产品规格:48T/96T。

兔血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒ICAELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

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