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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>肺癌细胞;A-427A427
 
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产品名称:
肺癌细胞;A-427A427
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
肺癌细胞;A-427[A427]相关产品:大鼠脱氢表雄酮硫酸酯ELISA检测试剂盒图片
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  肺癌细胞;A-427A427的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

肺癌细胞;A-427[A427]

贴壁生长

EY-X63366

细胞名称  肺癌细胞;A-427[A427]
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系由GiardDJ建立,源自一位52岁的肺癌男性白人患者。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA,1mM丙酮酸钠

传代方法: 1:2~1:6传代,6~8天1次;每周换液2次。

传代情况: C4

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-595形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-AIF1 Polyclonal Antibody

LMP2A杂交瘤细胞株;5C12C4A6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 贴壁生长

SAPS3 ELISA Kit
非洲绿猴肾系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用Α-D-五苯甲酸酰吡喃葡萄糖Human SRGN(Serglycin) ELISA Kit
非洲绿猴肾系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2拉丁属名: Streptomyces flavospinosporusΑ-D-五苯甲酸酰吡喃葡萄糖Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit
非洲绿猴肾系/HCV-p7;Vero-HCV-p7注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用4-溴-5-氟-2-硝苯Human SAR1B ELISA Kit
非洲绿猴肾系/HCV-E2;Vero-HCV-E2拉丁属名: Streptomyces anulatus4-溴-5-氟-2-硝苯Human SARM1 ELISA Kit
猕猴肺;MML2拉丁属名: Penicillium resedanum McLennan3-氯-4-酮Human SASS6 ELISA Kit
猕猴皮肤;MMS7拉丁属名: Staphylococcus  sp.2,2'-脱水-5-甲基尿苷Human SART3 ELISA Kit
猕猴皮肤;MMS4拉丁属名: Pseudomonas   syringae2,2'-脱水-5-甲基尿苷Human SART1 ELISA Kit
猕猴肌肉;MMm7拉丁属名: Streptomyces malaysiensis2-(二-叔丁基膦)-2'-(N,N-二甲基氨基)联苯Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit
恒河

肺癌细胞;A-427[A427]牛可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒Gzms-AELISAKit产品规格:48T/96T。

牛肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒Gzms-AELISAKit产品规格:48T/96T。

牛生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒Gzms-BELISAKit产品规格:48T/96T。

牛神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒Gzms-BELISAKit产品规格:48T/96T。

牛孕激素/孕(PROG)ELISA试剂盒Gzms-BELISAKit产品规格:48T/96T。

牛雌二醇(E2)ELISA试剂盒HAaseELISAKit产品规格:48T/96T。

牛载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒HABPELISAKit产品规格:48T/96T。

C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒HABPELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 肺癌细胞 A-427[A427]
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