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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)
 
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产品名称:
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)相关产品:猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa酶联免疫试剂盒价格
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  小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)的详细资料:

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)

贴壁生长

EY-X63507


细胞名称  小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)
形态特性: 球形

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 小鼠胚胎干细胞;在缺乏滋养层或条件培养基时,这株细胞自发分化成胚胎结构。它们可以注射回胚泡并参与形成生殖系。未分化细胞可以通过基因靶向技术进行基因改良。贴壁生长;形成球形。

培养条件: 干细胞培养基

传代方法:

传代情况: PN

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
rmDLL4, CF (50 UG)细胞名称: 棕果蝠肺成纤维细胞;FFBL3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDLL4 (50 UG)细胞名称: 棕果蝠皮肤成纤维细胞;FFBS3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDLL1/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 人胚胎皮肤成纤维细胞;HES DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDkk-4, CF (10 UG)细胞名称: 人皮肤成纤维细胞;HSAS4 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDkk-4 (10 UG)细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549] RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

rmDkk-2, CF (10 UG)细胞名称: 恒河猴肺细胞;RM-L1 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS

rmDkk-2 (10 UG)细胞名称: 大长舌果蝠肺细胞;DBL1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDkk-1, CF (10 UG)细胞名称: 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDkk-1 (His-tag), CF (10 UG)细胞名称: 小鼠胚胎细胞;BABL/C-E M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

rmDkk-1 (His-tag) (10 UG)细胞名称: 大长舌果蝠肌肉细胞;DBM1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDkk-1 (10 UG)细胞名称: 豚鼠肺细胞;GP-F1 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

rmDhh-N, CF (50 UG)细胞名称: 豚鼠皮肤细胞;GP-S1 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

rmDermatopontin, CF细胞名称: 豚鼠皮肤细胞;GP-S2 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

rmDectin-2a, CF (50 UG)细胞名称: 小鼠肺成纤维细胞;WML2 RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

rmDectin-1,CF (50 UG)细胞名称: 豚鼠心肌细胞;GP-H1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmDecorin, CF (100 UG)细胞名称: 豚鼠皮肤细胞;GP-S3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒PⅢNPELISAKit产品规格:48T/96T。

人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒PⅢNPELISAKit产品规格:48T/96T。

人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒PⅢNPELISAKit产品规格:48T/96T。

人纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒PⅢNPELISAKit产品规格:48T/96T。

11去氢血栓B2(11-DH-TXB2)ELISA试剂盒PⅢNPELISAKit产品规格:48T/96T。

2,3Dinor血栓B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA试剂盒PⅢNTELISAKit产品规格:48T/96T。

人溶血补体(Hc)ELISA试剂盒PⅢNTELISAKit产品规格:48T/96T。

人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)ELISA试剂盒PⅢNTELISAKit产品规格:48T/96T。

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