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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP
 
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产品名称:
小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP相关产品:
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  小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP的详细资料:

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产品名称

小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP

生长特性

贴壁生长

货号

EY-X63908

细胞名称  小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP
形态特性: 成纤维细胞

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 这这株细胞生成一种可以感染小鼠细胞的载体。Psi2DAP细胞生成的载体编码了人类胎盘碱性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。这株细胞通过Psi2细胞插入一个重组的逆转录病毒(DAP)基因组衍生而来。被这种Psi2DAP产生的载体感染的细胞表达的磷酸酯酶可用组织化学方法检测,可以用作体内追踪他们命运的标记。这些细胞也可能产生辅助病毒。检测辅助病毒的方法或其他逆转录病毒技术,请参考Cepko,C.L.Lineageanalysisandimmortalizationofneuralcellsviaretroviru

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清,10%

传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况: PN5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
趋化因子配体3检测试剂盒细胞名称: 珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系;PGSN形态特性: 上皮样ELISA Kit for ChemokineLigand 3

牙本质磷蛋白检测试剂盒细胞名称: 鞍带石斑鱼肾脏组织细胞系;GGKD形态特性: 上皮样dentin phosphoprotein

牙本质涎蛋白检测试剂盒细胞名称: 草鱼背鳍组织细胞系;GCDF形态特性: 上皮样human dentin sialoprotein

顺乌头酶1检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;9G2.5形态特性: 淋巴母细胞样aconitase 1

丙激酶同工酶R;L检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;H1A2形态特性: 淋巴母细胞样Pyruvate kinase isozymes R;L

CD320分子检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;2F8形态特性: 淋巴母细胞样Cluster of differentiation 320

β2转铁蛋白检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;F3A2形态特性: 淋巴母细胞样β2 transferrin

性别决定区Y框蛋白1检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;CH3形态特性: 淋巴母细胞样SOX-1

骨骼肌肌动蛋白α1检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;2F2形态特性: 淋巴母细胞样smActinin-α1

α横纹肌肌动蛋白检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;4G1形态特性: 淋巴母细胞样α-sarcomeric actin

脊髓灰质炎病抗体检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;1C8形态特性: 淋巴母细胞样poliovirus antibody

乙型流感嗜血杆菌抗体检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;4F2形态特性: 淋巴母细胞样Haemophilus influenzae type b antibody

脑膜炎双球菌抗体检测试剂盒细胞名称: 人癌多药耐药细胞株;MCF-7/ROS形态特性: 上皮样Neisseria meningitidis antibody

囊泡单胺转运蛋白2检测试剂盒细胞名称: 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-326形态特性: 上皮样Vesicular Monoamine Transporter 2

无翅型MMTV整合位点家族成员11检测试剂盒细胞名称: 杂交瘤细胞株;1H9形态特性: 淋巴母细胞样Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11

5-羟色胺受体1B检测试剂盒细胞名称: 分泌抗猪SC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株;4H11形态特性: 淋巴母细胞样5-Hydroxytryptamine Receptor 1B

抗胰蛋白酶抗体检测试剂盒细胞名称: 过表达CADM1的骨肉瘤细胞株;U-2os-CADM1形态特性: 上皮样Anti trypsin antibody
小鼠胚胎成纤维细胞;Psi2DAP长春质2468-21-5英文名:Catharanthine  

英文别名:(+)-3,4-Didehydrocoronaridine  

CAS登录号:2468-21-5

分子式:C21H24N2O2

分子量:336.42

分子结构:

规格:20mg/支

纯度:≥ 98%

用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源:夹竹桃科植物长春花Catharanthus roseus (L.)G.Don的全草

药理药效:止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。

贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年 

产品相关关键字: 小鼠胚胎成纤维细胞 Psi2DAP
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