细胞名称 卵巢癌细胞;HO-8910
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞是1994年从一位51岁的中国卵巢癌患者腹水中分离建立的;移植到裸鼠中形成的肿瘤组织与患者原发病灶的形态一致。STR检测发现SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402等多株细胞为同一遗传背景,怀疑彼此间存在交叉污染。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法: 1:3~1:4传代,2~3天1次。
传代情况: 不详
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
卵巢癌细胞;HO-8910 | 贴壁生长 | EY-X63430 |
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Tot JNK Pan DuoSet IC Econ Pk (1 PK)细胞名称: 皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
Tot HSP70 DuoSet IC Econ Pk (1 PK)细胞名称: 纤维肉瘤细胞;HT-1080 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA
Tot AMPKa1 DuoSet IC Econ Pack (1 PK)细胞名称: 耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
TOR PAb (100 UG)细胞名称: TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;400ug/mlG418
TiterTACS In Situ - Color Kit (96 TESTS)细胞名称: 神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
Tissue Control Slides (5 EA)细胞名称: 癌细胞;MDA-MB-157 L15:LeibovitzMedium10%FBS
Tissue Control Slides (2 EA)细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%CS
Thermostable TDG/Buffer (500 UN)细胞名称: 犬肾细胞;MDCK(NBL-2) DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
Thermolysin, CF (20 UG)细胞名称: 成骨肉瘤细胞;MG-63 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA
tgPFTG Aff Pur PAb (100 UG)细胞名称: 大鼠垂体瘤细胞;MMQ F12:Ham'sF12NutrientMixture2.5%FBS+15%HS
TGF-beta Pan Spec PAb (1 MG)细胞名称: 小细胞肺癌细胞;NCI-H446 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
TGF-b5 PAb (1 MG)细胞名称: 多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226[RPMI8826] RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
TGF-b3 PAb (1 MG)细胞名称: 脑瘤细胞;SF17 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
TGF-b3 MAb (Cl 44922) (500 UG)细胞名称: 神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
TGF-b3 MAb (Cl 20724.1) (500 UG)细胞名称: 肝癌细胞;SMMC-7721 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
TGF-b3 Biot MAb (Cl 20724.1) (250 UG)细胞名称: 羊膜细胞;WISH DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
卵巢癌细胞;HO-8910猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒IL-1αELISAkit产品规格:48T/96T。
猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒IL-1αELISAkit产品规格:48T/96T。
猪角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒IL-1αELISAkit产品规格:48T/96T。
猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒IL-1αELISAKit产品规格:48T/96T。
猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒IL-1βELISAKit产品规格:48T/96T。
猪免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒IL-1βELISAKit产品规格:48T/96T。
猪免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒IL-1βELISAKit产品规格:48T/96T。
猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒IL-1βELISAKit产品规格:48T/96T。