产品简介:

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的前列腺素 D2(PGD2)含量。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于炎症反应、睡眠调控及呼吸系统疾病研究等领域。
产品名称:大鼠前列腺素D2(PGD2)elisa试剂盒
英文名称:PGD2 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-5584E
检测原理:

大鼠前列腺素 D2 (PGD2) ELISA 试剂盒的原理是竞争法,通过固相载体包被抗原,样本中抗原与固相抗原竞争结合特异性抗体,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被 PGD2 人工抗原。
结合:加入标准品或样本与特异性抗体混合液,PGD2 与固相抗原竞争结合抗体。
检测:加入 HRP 标记的二抗,与结合在固相载体上的抗体形成复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成反比。
实验步骤:

试剂准备:将试剂盒平衡至室温(20-25℃),洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样:每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃去液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后甩干,重复5次。
加检测抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育60分钟。
洗涤:同步骤3。
显色:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,立即摇匀(颜色由蓝变黄)。
检测:450nm波长测定吸光度(OD值),15分钟内完成。
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关键实操技巧:

1.加样技巧
一次性换新枪头,垂直贴孔壁低位加液;避免气泡、飞溅交叉污染;整板加样速度均匀统一。
2.温育控温
须37℃恒温、封板膜严实防蒸发冷凝;时间严格卡死,过长背景高、过短信号低。
3.洗板核心
每孔注满不溢出,浸泡≥30 s;拍干用无尘吸水纸,杜绝残留;洗板不足直接高背景、假阳性。
4.样本规范
杜溶血、脂浊、污染样本;禁止反复冻融;严禁含 NaN₃抑制 HRP 活性;浓度超标只用试剂盒配套稀释液。
5.显色与读数
全避光;整板显色时长一致;加终止液立刻读数,放置越久数值漂移越大。
6.基础质控
样本、标准均做复孔;室温洁净避光操作;试剂分装取用,减少反复开盖失效。